Tehnologia de ghidare vă aduce să învățați metoda simplă și eficientă de desalinizare și concentrare
Proteinele trebuie adesea desarate după separare și purificare, iar aceste săruri sunt derivate în principal din diverși ioni din organismele vii (de exemplu, ioni de sodiu, ioni de potasiu, ioni de clorură etc.), precum și săruri tampon din extracte, săruri din eluanți și componente de sare ale anumitor denaturanți utilizați pentru experimente. Concentrația mare de sare poate afecta activitatea și stabilitatea proteinelor, precum și interacțiunile acestora cu alte molecule, generând semnale de interferență sau reducând acuratețea măsurătorilor în metodele analitice ulterioare, cum ar fi electroforeza, spectrometria de masă și studiile cristalografice. Prin urmare, este foarte necesară desalinizarea proteinelor purificate după separare, iar principalele metode de desalinizare des folosite sunt cromatografia pe membrană (dializă și ultrafiltrare) și cromatografia de filtrare pe gel. În plus, în unele cazuri, desalinizarea poate fi realizată și prin diluare.
Desalinizarea prin dializă, din cauza ciclului lung și a necesității unui număr mare de lichid de înlocuire, aplicarea sa a fost foarte limitată și este mai puțin utilizată în industrie, dar utilizată în principal parțial în laborator, laboratorul este, de asemenea, înlocuit treptat cu tuburi de ultrafiltrare. /cană de ultrafiltrare.
Principala tehnologie de separare prin membrană utilizată în procesul de desalinizare și concentrare a proteinelor este ultrafiltrarea. Ultrafiltrarea este o tehnologie de separare cu membrană cu eficiență ridicată, consum redus de energie, fără schimbare de fază, fără nevoie de adăugare de reactivi chimici, funcționare ușoară, condiții blânde, capacitatea care ar putea menține mai bine activitatea macromoleculelor biologice, rata mare de recuperare și alte avantaje , iar utilizarea sa în separarea și purificarea proteinelor are avantaje unice.
Ultrafiltrarea este o metodă de filtrare prin membrană care utilizează o membrană poroasă ca mediu de separare și se bazează pe diferența de presiune dintre cele două părți ale membranei ca forță motrice pentru a separa substanțele cu greutăți moleculare diferite în soluție, jucând astfel un rol în desalinizare, concentrare. și purificare. Aceasta este o metodă nouă dezvoltată în ultimii ani, care este cea mai potrivită pentru concentrarea sau desalinizarea macromoleculelor biologice, în special a proteinelor și enzimelor. Cheia pentru aplicarea ultrafiltrației este alegerea membranei, diferite tipuri și specificații ale membranei, au diferența de debit de apă, limitarea greutății moleculare și alți parametri, trebuie selectat în funcție de nevoile relevante de lucru. În plus, forma dispozitivului de ultrafiltrare, compoziția și proprietatea soluției, concentrația soluției etc. au o anumită influență asupra efectului ultrafiltrației.
Aplicarea tehnologiei de ultrafiltrare pentru desalinizarea și concentrarea proteinelor în procesul de purificare a proteinelor se caracterizează prin adecvarea sa pentru tratarea unor cantități mari de lichide, variind de la câteva sute până la câteva mii de litri, cu avantajele simplității în exploatare, economie de timp. și o rată ridicată de recuperare a proteinelor. Metoda de ultrafiltrare este maturată din tuburi de ultrafiltrare pentru prelucrarea în micro-volum de laborator, cupe de ultrafiltrare pentru prelucrarea în volum mic și sisteme de ultrafiltrare pentru uz industrial.
Ultrafiltrarea este subdivizată în ultrafiltrare cu presiune directă și filtrare cu flux tangențial, iar în prezent, filtrarea cu flux tangențial este utilizată în principal în industrie, care este utilizată pe scară largă în desalinizare și înlocuirea tamponului.
Următorul este un exemplu de aplicare a casetelor cu membrană de ultrafiltrare ale Guidling Technology în desalinizarea și concentrarea proteinelor.
Am folosit o casetă cu membrană cu dimensiunea porilor de {{0}}.11㎡ 10 kd (G01100010K) pentru a desara și a concentra 500 ml de soluție de hormon de creștere modificat cu PEG la o concentrație de 0,2 mg/mL. Pe parcursul procesului de ultrafiltrare, au fost examinate rata de desalinizare, rata de recuperare a proteinei, starea de defectare a fluxului membranei și rata de recuperare a fluxului de apă.
Înainte și după utilizare, am testat separat fluxul de apă al casetei cu membrană, iar rata de recuperare a casetelor cu membrană a ajuns la 98% sub premisa menținerii aceleiași viteze de alimentare, presiune de alimentare și presiune de reflux.
Întregul proces a procesat un total de 2 l de material și a durat 40min, 0-5min a fost procesul de concentrare, 5-35min a fost procesul de schimb de lichid și 35-40min. a fost procesul de supraconcentrare. Pe tot parcursul procesului de ultrafiltrare, TMP a fost stabilizat între 0,7-0,8 bar, viteza de alimentare a fost constantă, iar fluxul mediu de material a fost de 27 LMH.
2L de material concentrat schimb de lichid la 60 ml, de aproximativ 33 de ori concentrat, rata de desalinizare ajunge la 99%, rata de recuperare ajunge la 80%, după o spălare, o creștere de 50 ml de lichid, recuperarea totală de 88%, producția industrială conform volumul mort al calculelor conductei, pe cât posibil pentru a crește numărul de ori a spălării superioare, spălarea superioară generală de 3 ori poate fi complet recuperată.
Casetele cu membrană Guidling Technology sunt fabricate din materiale inerte de calitate medicală, cu rezistență puternică la coroziune și pot rezista la curățarea alcalină puternică; utilizarea procesului de fabricație automatizat asigură continuitatea și fiabilitatea calității produsului, rezistență mecanică mai mare, rezistență la contrapresiune și performanță de clătire repetată; are super-hidrofilitate, care poate da membranei un flux mai mare și o adsorbție mai scăzută a proteinelor; avem, de asemenea, un design optimizat al canalului de curgere, cu o cădere de presiune mai mică, care facilitează transferul de material și scurtează semnificativ timpul de filtrare.
Casetele noastre cu membrană sunt disponibile într-o gamă largă de dimensiuni ale porilor, de la 1kd la 1000kd. Printre acestea, casetele cu membrană de ultrafiltrare 1-10kd pot fi folosite pentru desalinizare și îndepărtarea pirogenului; Casetele cu membrană de ultrafiltrare de 30 kd pot fi utilizate pentru concentrarea anticorpilor monoclonali și înlocuirea tamponului; în același timp, produsele noastre cu fibre goale pot fi utilizate și pentru concentrarea și înlocuirea substanțelor biologice, cu dimensiuni ale porilor de 100kd, 300kd și 500kd, care sunt utilizate în principal pentru un număr mare de aplicații în produsele vaccinale.
Guidling Technology este o întreprindere națională de înaltă tehnologie care se concentrează pe produse biofarmaceutice, culturi celulare, purificare și concentrare de biomedicină, diagnostic și fluide industriale. Am dezvoltat cu succes dispozitive de filtrare centrifugale, casete de ultrafiltrare și microfiltrare, filtru de virus, sistem TFF, filtru de adâncime, fibră goală, etc. Care îndeplinesc pe deplin scenariile de aplicare ale biofarmaceutice, culturi celulare și așa mai departe. Membranele noastre și filtrele cu membrană sunt utilizate pe scară largă în concentrarea, extracția și separarea prefiltrarii, microfiltrarii, ultrafiltrarii și nanofiltrarii. Numeroasele noastre linii de produse, de la filtrare de laborator mică, de unică folosință, la sisteme de filtrare de producție, testare de sterilitate, fermentare, cultură celulară și multe altele, răspund nevoilor de testare și producție. Guidling Technology așteaptă cu nerăbdare să coopereze cu tine!
