Un proces eficient și cu costuri reduse pentru clarificarea și ultrafiltrarea proteinelor recombinante care exprimă drojdia

Expresia de drojdie a genelor exogene nu poate produce numai proteine ​​și peptide recombinante, anticorpi și vaccinuri, citokine, factori de creștere, hormoni și alte substanțe bioactive, dar poate fi folosită și pentru a produce enzime industriale, alimente funcționale și materiale biologice, care are perspective largi de aplicare. .

 

Sistemul de expresie a drojdiei include două sisteme de expresie utilizate în mod obișnuit, adică sistemul de expresie saccharomyces cerevisiae și sistemul de exprimare a drojdiei metanotrofice. Sistemul de exprimare a drojdiei cu metanol este cel mai utilizat sistem de exprimare a drojdiei în prezent, iar Pichia este cel mai frecvent utilizat, care poate folosi metanolul ca carbon și energie. În plus, există drojdia lui Hansen, Sphaeroides și așa mai departe.

 

Indiferent de ce fel de sistem de exprimare a drojdiei, procesele sale de separare și purificare în aval sunt similare, iar fluxul specific al procesului ia ca exemplu expresia drojdiei a proteinelor recombinante și a medicamentelor polipeptidice.

 

Casetele cu membrană de microfiltrare de ghidare adoptă un canal de curgere deschis și un mod de filtrare cu flux tangențial, care poate procesa eficient lichid de alimentare complex, cum ar fi lichidul de fermentare a drojdiei și lichidul de cracare a E. coli la viteză mare, și poate asigura amplificarea liniară de la teste mici la scară de producție. Design modular compact, conexiune simplă la conducte, independența și lizibilitatea sistemului pot proteja operatorii și pot preveni poluarea biologică. Și nicio verificare de întreținere și curățare. Prin urmare, este foarte potrivit pentru etapa de clarificare a prelucrării timpurii în aval.

 

Scopul principal al procesului UF/DF este de a elimina impuritățile și de a deplasa tampoanele. Caseta cu membrană de ultrafiltrare de ghidare are o omogenitate bună a dimensiunii porilor membranei și o hidrofilitate puternică, ceea ce poate oferi membranei un flux mai mare și o adsorbție mai scăzută a proteinelor și un design optimizat al canalului de curgere, cu cădere de presiune mai mică, transfer ușor de material și scurtează semnificativ timpul de filtrare. În plus, seria de produse este completă și flexibilă pentru a răspunde nevoilor diverselor aplicații de diferite scări. Prin urmare, este foarte potrivit pentru etapa UF/DF de procesare în aval.

 

Următorul este cazul de aplicare a membranei Guidlingcasetăîn expresia din drojdie a proteinelor recombinante.

 

Limpezirea prin microfiltrare

Am folosit caseta cu membrană cu pori de {{0}},11 metri pătrați de 0,22μm pentru a clarifica 1,5L lichid de fermentare a drojdiei (greutatea moleculară a proteinei țintă 42-55 KD) prin microfiltrare. În întregul proces de microfiltrare, au fost investigate rata de recuperare a proteinei țintă, modificarea turbidității și epuizarea fluxului membranar.

0-17min este procesul de concentrare, 17-32min este procesul de spălare și filtrare. Pe parcursul întregului proces de microfiltrare, TMP a crescut treptat, viteza de intrare a lichidului a rămas neschimbată, iar fluxul mediu de material a fost de 45LMH.

Turbiditatea lichidului a fost de 600 NTU înainte de microfiltrare și 8 NTU după microfiltrare, iar turbiditatea s-a schimbat evident.

Rezultatele au arătat că randamentul proteinei țintă a fost > 90%. Caseta cu membrană Guidling Technology de 0,22 μm este stabilă și potrivită pentru acest scenariu de aplicare.

 

Concentrația de ultrafiltrare

 

 

Rezultatele au arătat că proteina țintă a fost complet prinsă. Casetele cu membrană Guidling Technology 10kd pot funcționa stabil și sunt potrivite pentru acest scenariu de aplicație.

Majoritatea proteinelor recombinante exprimate de drojdie nu au fost foarte exprimate. Turbiditatea lichidului filtrat a fost în mod evident redusă și rata de recuperare a proteinei a fost mai mare. Deoarece timpul cromatografic ulterior este prea lung, va provoca efecte adverse asupra proteinei, pentru a scurta timpul de prelevare cromatografică, se poate adăuga o etapă de concentrație de ultrafiltrare, iar proteina țintă poate fi concentrată rapid după probă, ceea ce poate atinge scopul de a economisi timp, de a reduce volumul de umplere și de a reduce astfel costul de producție.

 

Casetele cu membrană de microfiltrare Guidling Technology pot reduce, în general, turbiditatea lichidului de alimentare la mai puțin de 20NTU, satisfacând pe deplin nevoile de ultrafiltrare și cromatografie ulterioară. Rata de recuperare prin ultrafiltrare a casetelor cu membrană de ultrafiltrare va varia din cauza diferitelor materiale, rata generală de recuperare poate ajunge la 90-95%.

Tehnologia Guidling vă întâmpină să solicitați truse de testare pentru evaluarea aferentă.

 

Despre Guidling

Guidling Technology este o întreprindere națională de înaltă tehnologie care se concentrează pe produse biofarmaceutice, culturi celulare, purificare și concentrare de biomedicină, diagnostic și fluide industriale. Am dezvoltat cu succes dispozitive de filtrare centrifugale, casete de ultrafiltrare și microfiltrare, filtru de virus, sistem TFF, filtru de adâncime, fibră goală, etc. Care îndeplinesc pe deplin scenariile de aplicare ale biofarmaceutice, culturi celulare și așa mai departe. Membranele noastre și filtrele cu membrană sunt utilizate pe scară largă în concentrarea, extracția și separarea prefiltrarii, microfiltrarii, ultrafiltrarii și nanofiltrarii. Numeroasele noastre linii de produse, de la filtrare de laborator mică, de unică folosință, până la sisteme de filtrare de producție, testare de sterilitate, fermentație, cultură celulară și multe altele, răspund nevoilor de testare și producție. Guidling Technology așteaptă cu nerăbdare să coopereze cu tine!